Description

Un método de tinción diferencial que permite la observación de las células sanguíneas. Debido a la interacción entre los colorantes se pueden diferenciar los núcleos y los gránulos de color violeta. Se trata de una modificación de la tinción de Romanowsky, dando un procedimiento basado en inmersiones mucho más rápido.

Reactivos:

A. – Fijador Metanol

B. – Eosina Red

C. – Counter Blue

Condiciones de almacenamiento y estabilidad

Los reactivos almacenados a temperatura ambiente (15-25ºC) y protegidos de la luz son estables hasta la fecha de caducidad indicada. A temperaturas inferiores a 15ºC puede precipitar el colorante en este caso será necesario filtrar.

Precauciones

La solución fijadora contiene metanol por lo que es inflamable y tóxico por inhalación e ingestión.

Eliminar los residuos según la normativa legal vigente.

Técnica

– Preparar la extensión de sangre en el portaobjetos y dejar secar al aire.

– Preparar 3 cubetas con cada colorante.

– Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con el reactivo 1. Escurrir el exceso de colorante.

– Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con la solución de reactivo 2.

– Sumergir 5 veces durante 1 segundo cada una el portaobjetos en la cubeta con la solución de reactivo 3.

– Lavar con agua destilada y dejar secar.

– Observar al microscopio.

Resultados

Eritrocitos: color rosa pálido.

Plaquetas: color violeta claro.

Neutrófilos: núcleo violeta oscuro, citoplasma violeta claro con gránulos violeta oscuro.

Basófilos: núcleo violeta oscuro, gránulos violeta oscuro.

Eosinófilos: núcleo violeta oscuro, citoplasma violeta con gránulos rojizos- violeta.

Linfocitos: núcleo violeta oscuro, citoplasma un poco más claro.

Monocitos: núcleo violeta oscuro, citoplasma un poco más claro.

Notas sobre el uso

El número de inmersiones en las cubetas de los colorantes 2 y 3 puede ser modificado si se pretende aumentar las coloraciones rosas o violetas.

Guardar las cubetas del reactivo 1 tapadas ya que se puede producir la evaporación del reactivo y dar errores en la tinción.